Növénytermelés / 62. évfolyam / 1. szám (2013. március) / 53-72. oldal
Nagy B; Majer P; Mihály R; Pauk J; Dudits D; Horváth VG
Fluoreszcencia detekciós módszeren alapuló szárazság stressz tolerancia vizsgálatok a lucerna aldóz reduktáz fehérjét (MsALR) termelő árpa növényeken
Az árpa (Hordeum vulgare L.) nemcsak takarmányozási és malátakészítés szempontjából fontos és értékes gabonaféle, hanem a rizs mellett a gabonafélék ideális genetikai modellnövénye is. A környezeti stressz hatások elleni hatékony védekezés érdekében folyamatos igény van az ellenálló növények nemesítésére. A modern biotechnológiai módszerek hatékonyan segíthetik e nemesítő munkát. Kísérleteink célkitűzése egy sejtszintű tesztrendszer továbbfejlesztése volt, mellyel rutinszerűen vizsgálható egyes gének szerepe, különböző labor körülmények között előidézhető stresszkezelés esetén, stabil genetikai transzformációs háttérben. A transzgénikus növények Agrobacterium tumefaciens által közvetített előállításához egy, az oxidatív stressz elleni védelemben szerepet játszó, a lucernából izolált aldo-keto reduktáz gént (MsALR) választottuk. A transzgénikus jelölt növények immunoblot analízise a transzformáció sikerességét bizonyította. A kiválasztott, magas expressziós szinttel rendelkező növényvonalat a transzgén kópiaszámának meghatározása után, egy, a laboratóriumi körülményeinkhez igazított tranziens expressziós tesztrendszerben vizsgáltuk. A GFP és DsRed expressziós plazmidok keverékével tranziensen transzformált növényeken a dehidratációs stresszkezelés előtt számolt zöld (GFP) és a stresszkezelés végén számolt vörös (DsRed) fluoreszcenciát mutató epidermisz sejtek aránya, valamint a párhuzamosan mért klorofill és karotinoid tartalom a vizsgált transzgénikus vonalnak az alkalmazott stresszel szembeni megnövekedett ellenállóságát mutatta.
Kulcsszavak: árpa genetikai transzformáció, stressztűrés, GFP/DsRed fluoreszcencia analízis