Растениеводство / 62 год / 1 номер (март 2013) / pp. 53-72
Nagy B; Majer P; Mihály R; Pauk J; Dudits D; Horváth VG
Исследования толеранции стресса засухи, основанные на методе детекционной флуорисценции, на производящем белок алдоз редуктазы люцерны(MsALR) на растениях ячменя
Ячмень (Hordeum vulgare L.) не только с точки зрения фуража и изготовления солода важная и ценная зерновая культура, но вместе с рисом также идеальная генетическая модель зерновых культур. В интересах эффективной защиты от влияния стрессов окружающей среды есть постоянная потребность в селекции устойчивых растений. Современные биотехнологические методы эффективно могут помочь в этой селекционной работе. Целью наших исследований было дальнейшее развитие системы тестов на клеточном уровне, которым рутинно можно исследовать роль отдельных генов, в случае обращения со стрессом, вызванным в различных лабораторных условиях, при стабильном генетическом трансформационном фоне. Для приготовления трансгенных растений посредством Agrobacterium tumefaciens выбрали один, играющий роль в стрессе против окисления, изолированный из люцерны ген алдо-кето редуктазы (aldo-keto reduktáz) (MsALR). Иммуноблот анализ обозначенных трансгенных растений подтвердил успешность трансформации. Выбранную линию растения, обладающую высоким экспрессионным уровнем, после определения трансгенного числа копий исследовали в одной, соответствующей лабораторным условиям переходной экспресионной системе тестов. Смешиванием экспрессионных плазмидов GFP и DsRed на переходных (транзиентных) трансформированных растениях до обработки дегидрационным стрессом соотношение посчитанных зелёных (GFP) и в конце стресса подсчитанных красных (DsRed), показывающих флуоренсцию эпидермис клеток, а также параллельно измеренное содержание хлорофила и каротиноида исследованных трансгенный линий при использованном стрессе показала возросшую сопротивляемость этому стрессу.
Keywords: генетическая трансформация ячменя, выносливость к стрессу, анализ флуорисценции GFP/DsRed